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轉(zhuǎn)TaDREB3a基因大豆材料抗旱性鑒定

李冬梅; 李悅; 李永光; 李文濱 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆生物學(xué)教育部重點實驗室; 哈爾濱150030
  • 大豆
  • 轉(zhuǎn)錄因子
  • 遺傳穩(wěn)定性
  • 抗旱性評價

摘要:研究通過分子生物學(xué)方法證明TaDREB3a基因已整合至大豆基因組中,對T1~T3連續(xù)3代大豆植株作篩選鑒定并分析遺傳穩(wěn)定性,初步評價室內(nèi)和田間抗旱表現(xiàn)。通過除草劑篩選獲得T1代135株抗性植株,經(jīng)PCR檢測其中96株擴增出基因目的條帶,獲得15個陽性TaDREB3a過表達大豆T1代株系;T2代轉(zhuǎn)基因大豆株系經(jīng)PEG模擬干旱處理和PCR鑒定獲得陽性TaDREB3a過表達大豆T2代株系共10個;T3代轉(zhuǎn)基因大豆株系經(jīng)PCR鑒定、半定量PCR鑒定、Bar基因試紙條檢測、Southern blot分析、Western blot分析,獲得6個轉(zhuǎn)基因陽性株系,證實TaDREB3a基因已整合于大豆基因組,可轉(zhuǎn)錄完整目的mRNA,其中4個株系檢測到目的蛋白表達。盆栽干旱試驗顯示,TaDREB3a過表達可改善轉(zhuǎn)基因大豆干旱條件下生長狀況,轉(zhuǎn)基因植株株高和莢數(shù)明顯優(yōu)于對照組植株;大田干旱試驗結(jié)果顯示,TaDREB3a過表達株系提高大豆抗旱性、改善干旱條件下地上形態(tài),減少產(chǎn)量損失。

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