摘要：目的:制備針對(duì)人釉原蛋白的單克隆抗體,并對(duì)其免疫學(xué)特性進(jìn)行鑒定。方法:用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)純化的重組人全長(zhǎng)釉原蛋白免疫BALB/c小鼠,利用雜交瘤技術(shù)融合免疫后小鼠脾細(xì)胞和小鼠骨髓瘤SP2/0細(xì)胞,采用有限稀釋法和間接酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法篩選出能夠穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)制備腹水,通過(guò)飽和硫酸銨沉淀法和蛋白G親和層析柱純化抗體。結(jié)果:篩選到3株能穩(wěn)定分泌抗人釉原蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為H10G1、H3G1、G5H3。腹水單克隆抗體效價(jià)分別為1∶243000、1∶729000、1∶729000,純化后單克隆抗體效價(jià)為1∶81000、1∶243000、1∶729000。3株單克隆抗體抗原表位分析顯示均識(shí)別人釉原蛋白45~149位的氨基酸序列。結(jié)論:成功制備出針對(duì)人釉原蛋白的特異性單克隆抗體,為進(jìn)一步研究探討釉原蛋白在牙根發(fā)育及牙周再生中的功能奠定了基礎(chǔ)。