摘要：目的目的以Picrophilus torridus DSM9790基因組為模板,克隆嗜熱酯酶EstPt 1的基因,實現(xiàn)其在大腸桿菌BL21(DE3)中的表達,并對重組EstPt 1進行酶學性質表征。方法利用PCR擴增,獲得EstPt 1基因,連接到pET-28a(+)質粒,將重組質粒轉化入大腸桿菌BL21(DE3)中,構建重組工程菌株。通過聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),對硝基苯酚法(pNPB),薄層色譜(TLC)和高效液相色譜法(HPLC)對EstPt 1的性質進行研究。結果EstPt 1成功表達,分子量為35 kD;最適反應溫度為85℃,最適pH 9.0,有良好的熱穩(wěn)定性和酶活,能在24 h內完全降解5 mmol/L鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)。結論重組EstPt 1有很強的高溫耐受性和穩(wěn)定性,以及良好的DBP降解活性。