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鳥苷二磷酸雜化磷酸鈣基因傳遞系統的制備與細胞學評價

張熹睿; 趙明; 陳大為; 胡海洋 沈陽藥科大學藥學院; 遼寧沈陽110016
  • 基因傳遞系統
  • 磷酸鈣納米粒
  • 鳥苷二磷酸
  • 核定位信號
  • 共沉淀法

摘要:目的采用共沉淀法制備磷酸鈣基因給藥系統(CaP/pDNA),考察工藝因素和處方因素對CaP/pDNA制備的影響。在此基礎上,加入鳥苷二磷酸(GDP)和核定位信號(NLS)制備GDP雜化的磷酸鈣基因傳遞系統Ca(P-GDP)/pDNA/NLS,考察GDP的加入對該系統制劑學性質以及對基因的體外轉染的影響。方法通過共沉淀法,以無水CaCl2為鈣源,Na2HPO4·12 H2O為磷源制備CaP/pDNA納米粒,考察Na2HPO4濃度,攪拌速度和攪拌時間對其粒徑和包封率的影響,篩選最佳工藝條件和處方組成。以Na2HPO4·12 H2O和GDP為共同磷源,制備Ca(P-GDP)/pDNA/NLS納米粒。通過體外細胞毒實驗和細胞轉染實驗對制劑加以優化,最終獲得具有最佳制劑學性質和體外轉染效果的GDP雜化的新型磷酸鈣基因傳遞系統。結果 CaP/pDNA優化處方為Na2HPO4濃度為4 mmol·L-1,攪拌速度為200 r·min-1,反應時間為15 min。CaP/pDNA納米粒的粒徑為160.7 nm,包封率為81.2%;制備的Ca(P-GDP)/pDNA/NLS納米粒在GDP濃度為20 mmol·L-1時轉染效果最好,其粒徑為182.9 nm,包封率為84.6%。與參比制劑相比,Ca(P-GDP)/pDNA/NLS納米粒具有更高的體外轉染效率。結論 GDP可以促進含有NLS的磷酸鈣基因傳遞系統的基因的表達效率。

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沈陽藥科大學學報

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