摘要：目的:構建hFGFR1α(human fibroblast growth factor receptor 1 alpha, hFGFRα)穩定細胞系,優化獲得最適誘導表達條件,實現可誘導的、高效的穩定表達。方法:將hFGFR1α基因編碼區全長克隆入pcDNA5/FRT/TO/2 × Flag表達載體,連同pOG44重組酶質粒共轉染人宿主細胞Flp-InTM-T-RexTM-293細胞系(HEK293H),潮霉素B篩選獲得陽性克隆細胞系HEK293H/hFGFR1ɑ。用不同濃度強力霉素(doxycline, Dox)或者不同作用時間對HEK293H/hFGFR1ɑ細胞系進行誘導表達,Western Blot鑒定hFGFR1ɑ蛋白的表達情況。結果:構建了pcDNA5-FRT/TO/2 × Flag/hFGFR1ɑ重組表達載體,獲得了可被Dox誘導表達的HEK293H/hFGFR1ɑ穩定細胞系;0.001μg/mL Dox即可誘導hFGFR1ɑ蛋白表達,0.01μg/mL Dox即可誘導表達量達峰值;Dox對該細胞系作用2 h即誘導hFGFR1ɑ蛋白表達,對其作用24 h后該細胞系的表達明顯增強。結論:成功構建了可誘導的、高效的穩定表達細胞系HEK293H/hFGFR1ɑ;Dox誘導該細胞系表達具有劑量差異性和時間依賴性。