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DHPLC和PCR-SSCP兩種方法篩查基因變異的比較

趙芳芳; 張鳴明; 羅玉柱; 李少斌 甘肅農業大學動物科學技術學院; 甘肅省草食動物生物技術重點實驗室; 甘肅省牛羊基因改良工程實驗室; 蘭州730070; 甘肅省商業科技研究所有限公司; 蘭州730070
  • 基因
  • 突變
  • dhplc

摘要:SNP(Single nucleotide polymorphism)被認為是揭示遺傳變異最理想的遺傳標記,廣泛應用于疾病相關的基因篩查、動植物經濟性狀遺傳標記、群體遺傳進化等。目前,篩查SNP的方法很多,文章旨在比較DHPLC(Denaturing high performance liquid chromatography)和PCR-SSCP(Polymerase chain reaction-single stranded conformational polymorphism)兩種方法在篩查同一基因片段變異的效果,為篩查基因突變的方法提供選擇依據。以綿羊孕酮受體基因(PGR)第4外顯子為突變篩查對象,以DHPLC和PCR-SSCP兩種方法篩查基因變異,以直接測序作為標準,對比分析兩種方法在檢出率、準確率、經濟性和自動化程度等方面的優劣。結果表明:在對391份藏綿羊血液樣品的PGR基因進行分析后,SSCP法檢出率100%,而DHPLC法檢出率僅83.63%;DHPLC法準確率97.25%,高于SSCP法的94.37%;同時操作性和自動化方面DHPLC法要優于SSCP法,但其檢測成本比SSCP法高20倍左右;SSCP法應用的廣泛性比DHPLC高許多,其中在畜牧和動物醫學這兩門學科中應用最多,而DHPLC法在人類醫學研究中的應用較多。結論:DHPLC法適合運用于基因突變率低和已完全測出基因序列的物種,具有準確率高、操作簡單和自動化程度高等優點;SSCP法對基因序列是否已知及突變率高低無要求,具有檢出率高、成本低等優點,此法在動物育種領域中應用更為廣泛。

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中國草食動物科學

  • 預計1-3個月 預計審稿周期
  • 0.74 影響因子
  • 生物 快捷分類
  • 雙月刊 出版周期

主管單位:中華人民共和國農業農村部;主辦單位:中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所

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