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異丙酚干預下人羊膜間充質干細胞移植對大鼠腦損傷的影響

張建軍; 王東 天津市第四中心醫院神經外科; 天津300000
  • 人羊膜間充質干細胞
  • 移植
  • 異丙酚
  • 大鼠
  • 腦損傷

摘要:目的人羊膜間充質干細胞(AM-MSCs)移植同時予以異丙酚治療,觀察兩者對腦損傷大鼠恢復的影響。方法健康SD鼠80只,雌雄各半,體質量300~350g。體外復蘇并培養人羊膜間充質干細胞(CM-Dil標記)移植前備用。采用液壓顱腦損傷儀,給予液壓沖擊力,制成重型液壓顱腦損傷模型,傷后6h給予相應治療隨機分成4組:損傷組(培養液移植組)、AM-MSCs移植組、異丙酚組、AMMSCs+異丙酚組。利用CM-Dil標記在熒光顯微鏡下觀察各組的陽性細胞數。移植后4周各組隨機處死6只,并用RT-PCR、WesternBlot檢測腦組織中GAP-43、AQP4基因表達和蛋白合成的變化。移植后24h,3天及1、2、3、4周行動物神經學缺損評分,在移植后4周進行Morris水迷宮(Morris Water Maze,MWM)試驗。四周后處死行免疫組化、HE染色。結果CM-Dil的陽性細胞數AM-MSCs+異丙酚組最多,異丙酚組、AM-MSCs移植組次之,損傷組最少,且各組之間差異有顯著性意義(P<0.05)。移植后4周腦損傷周圍組織AQP4及其mRNA的表達損傷組高于AM-MSCs移植組、異丙酚組;AM-MSCs移植組、異丙酚組高于AM-MSCs+異丙酚組(P<0.05);GAP-43及其mRNA的表達損傷組低于AM-MSCs移植組、異丙酚組,AM-MSCs移植組、異丙酚組低于AM-MSCs+異丙酚組(P<0.05)。移植后1周,大鼠神經功能障礙評分AM-MSCs+異丙酚組低于異丙酚組、AM-MSCs移植組;異丙酚組、AM-MSCs移植組低于對照組(P<0.05)。AM-MSCs+異丙酚組穿越平臺次數高于異丙酚組、AM-MSCs移植組(P<0.05),明顯高于損傷組(P<0.01)。觀察傷后4周病理切片,損傷組未見神經軸索通過,異丙酚組、AM-MSCs移植組可見少量神經軸索樣結構,AM-MSCs+異丙酚組可見較多神經軸索樣結構。結論異丙酚聯合人羊膜間充質干細胞移植治療大鼠腦損傷可明顯改大鼠的神經學功能。

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