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高溫熱應激構建小鼠精原干細胞移植受體模型

馬珂; 田稼; 裴承斌; 張紹華; 趙寶運; 馬良宏; 王紅燕 寧夏醫科大學臨床醫學院; 寧夏銀川750004; 寧夏醫科大學總醫院寧夏人類精子庫/生育力保持教育部重點實驗室; 寧夏銀川750004; 寧夏醫科大學總醫院泌尿外科; 寧夏銀川750004
  • 高溫熱應激
  • 精原干細胞
  • 移植受體
  • 小鼠

摘要:目的:探討高溫熱應激方法構建小鼠精原干細胞(SSCs)移植受體的可行性。方法:將4周齡的C57BL/6雄鼠和B6(Cg)-Tyrc-2J/J毛色基因純合突變雄鼠置于恒溫箱內,43℃熱應激處理1 h,通過HE染色、免疫組化染色和TUNEL凋亡檢測,尋找最佳移植時間;隨后將SSCs移植入小鼠生精小管,定期觀察移植后受體小鼠睪丸內SSCs增殖、分化及形成精子的情況,并將受體小鼠與正常同周齡雌鼠交配,觀察其后代表觀遺傳學特征。結果:高溫熱應激3~5 d后受體小鼠睪丸生精小管內生精細胞層數減少,排列紊亂、疏松且大量缺失,間質細胞數量明顯減少,生精細胞凋亡明顯,自噬水平升高,12 d左右基本恢復。在分離純化后的SSCs移植8周后,受體小鼠睪丸生精小管內分化形成生精細胞及具有遺傳功能的精子,經過自然交配產生正常的后代。結論:高溫熱應激方法可快速、高效構建小鼠精原干細胞移植受體模型。

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中華男科學

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