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膠質(zhì)瘤干細(xì)胞趨化神經(jīng)干細(xì)胞遷移及其機(jī)制研究

張所軍; 胡峰; 謝蕊繁; 王寶峰; 葉飛; 萬鋒; 郭東生; 雷霆 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院神經(jīng)外科; 武漢430030
  • 神經(jīng)干細(xì)胞
  • 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞
  • 遷移
  • 趨化因子

摘要:目的觀察神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)向膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(GSC)及其分化細(xì)胞的遷移能力,探討其趨化機(jī)制。方法干細(xì)胞條件培養(yǎng)U251和3例原代膠質(zhì)瘤干細(xì)胞,以流式細(xì)胞術(shù)和Westernblot對(duì)其鑒定;Transwell小室法檢測GSC和其分化細(xì)胞條件培養(yǎng)液(CM)對(duì)NSC遷移的趨化能力;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測CM中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)的分泌水平,并以表皮生長因子(EGF)、bFGF為對(duì)照分析CM對(duì)NSC的化學(xué)趨化作用;進(jìn)一步以Dio和Dil分別標(biāo)記NSC和GSC,體外混合培養(yǎng)觀察NSC向GSC的遷移、以及對(duì)腫瘤干細(xì)胞球生長的影響。結(jié)果干細(xì)胞培養(yǎng)條件下的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞球,高表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)志物Nestin和/或CD133(11.02%-33.55%);分化后干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)下降,分化標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)增加(P〈0.05);GSC與其分化細(xì)胞比較,分泌高水平的趨化因子VEGF和bFGF(P〈0.05),并對(duì)NSC有高度趨化能力;體外混合接觸培養(yǎng)也顯示NSC向腫瘤干細(xì)胞球的遷移和包繞,并且能夠顯著抑制腫瘤干細(xì)胞球的生長(P〈0.05)。結(jié)論GSC體外可趨化NSC向其遷移,其趨化作用較分化的腫瘤細(xì)胞更為顯著,并且與其分泌高水平的生長因子有關(guān);向腫瘤干細(xì)胞球遷移的NSC可抑制其體外生長。

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中華實(shí)驗(yàn)外科

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