摘要：目的探討托瑞米芬逆轉(zhuǎn)乳腺癌耐藥蛋白（BCRP）介導的多藥耐藥機制。方法通過基因擴增，構(gòu)建分別由BCRP啟動子和巨細胞病毒（CMV）啟動子啟動表達BCRP的重組質(zhì)粒pcDNA3-Pmmoter-BCRP和作為對照的質(zhì)粒pcDNA3-CMV-BCRP，將其分別轉(zhuǎn)染雌激素受體Ⅸ（ERa）陽性的MCF-7和ERα陰性的MDA-MB-231乳腺癌細胞系，建立由BCRP啟動子和CMV啟動子啟動表達BCRP的4種耐藥細胞系MCF-7／Promoter-BCRP、MCF-7／CMV-BCRP、MDA-MB-231／Promoter-BCRP和MDA—MB-231／CMV-BCRP。在耐藥細胞培養(yǎng)基中加入托瑞米芬，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）、Western blot、外排實驗以及細胞毒性實驗觀察托瑞米芬對不同細胞系的耐藥逆轉(zhuǎn)效果。結(jié)果與空白對照組（未加藥物）相比，托瑞米芬以劑量依賴方式抑制BCRP mRNA的表達，0．1、1和10μmol／L托瑞米芬處理組MCF-7／Promoter—BCRP細胞中BCRP mRNA的表達水平分別下調(diào)29．5％（P〈0．05）、68．1％（P〈0．01）和97．4％（P〈0．01）；MCF-7／Promoter—BCRP細胞經(jīng)托瑞米芬和17β-雌二醇聯(lián)合處理后，細胞中BCRPmRNA的相對表達水平為64．2％±1．3％，明顯高于托瑞米芬單獨處理組（3．8％±0．2％，P〈0．01）。托瑞米芬對各組細胞系中BCRP蛋白表達的調(diào)控作用與mRNA相似。經(jīng)托瑞米芬處理后，MCF-7／Promoter-BCRP細胞內(nèi)米托蒽醌的熒光強度顯著增強，外排米托蒽醌的能力降低了47．3％（P〈0．05）；經(jīng)托瑞米芬和17β-雌二醇聯(lián)合處理后，MCF-7／Promoter—BCRP細胞內(nèi)米托蒽醌的熒光強度明顯低于托瑞米芬單獨處理組，外排米托蒽醌的能力升高了61．5％。托瑞米芬可有效逆轉(zhuǎn)MCF-7／Promoter—BCRP細胞對米托蒽醌的耐藥性。上述作用在MCF-7／CMV-BCRP、MDA—MB-231／Promoter-BCRP和MDA—MB-231／CMV-BCRP細胞中未能體現(xiàn)。結(jié)論托瑞米芬可能通過ERot的介導與BCRP啟動子上游調(diào)控序列中的ERE結(jié)合，負性調(diào)節(jié)BCRP的表達