摘要：采集一疑似犬細小病毒(CPV)患犬的糞便,用納米PCR方法對病料進行CPV檢測,并應(yīng)用貓腎細胞F81進行病毒分離培養(yǎng),采用免疫過氧化物酶單層細胞染色法(IPMA)檢測病毒在F81細胞中的增殖動態(tài)。利用PCR擴增分離病毒的VP2基因,測序結(jié)果用DNAMAN軟件對獲得的VP2基因序列進行拼接,并與NCBI上已經(jīng)公布的犬細小病毒的全基因組序列以及相關(guān)蛋白的核酸序列進行比較,確定其所分離的病毒株型并推導(dǎo)氨基酸序列。結(jié)果表明,納米PCR檢測結(jié)果為CPV核酸陽性,病料接種到F81細胞培養(yǎng)后出現(xiàn)明顯細胞病變(CPE),血清學鑒定為CPV抗原陽性,序列測定分析表明,該毒株VP2基因開放閱讀框(ORF)為1755 bp。進化分析顯示,該毒株屬于CPV-2c型,并命名為CPV-2c-Guangxi23。